rRNA扩增方法对结核分枝杆菌临床诊断作用的评估

摘要/Abstract

摘要： 目的评价rRNA扩增方法在临床应用的效果。方法选取到北京胸科医院、山东省胸科医院、河南疾控中心结核病防治所3个机构就诊的肺结核可疑症状者及健康志愿者的痰标本为研究对象，共纳入551例痰标本,对每例痰标本均进行涂片显微镜检查、罗氏培养、rRNA扩增试验以及实时荧光定量PCR。与罗氏培养方法比较分析rRNA扩增方法的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值以及与实时荧光定量PCR扩增方法的一致性。结果rRNA扩增方法的敏感性为98.5%，特异性为95.0%，阳性预测值为95.0%，阴性预测值为98.5%，rRNA扩增方法在涂阳标本和涂阴标本间的敏感度和特异度差异均有统计学意义（χ²=9.60，P=0.002；χ²=79.80，P<0.01）。与PCR检测结果的一致性为93.8%，涂阳和涂阴标本中2种方法的一致性差异有统计学意义（χ²=4.45，P=0.035）。结论 rRNA扩增方法的敏感度和特异度均较好，且能明显缩短诊断时间，该方法是一种较有前景的结核病实验室诊断方法。

关键词: 结核, 肺/诊断, 分枝杆菌, rRNA扩增技术, 敏感性与特异性

Abstract: Objective To evaluate the clinical value of rRNA amplification assay in the detection ofMycobacterium tuberculosis . Methods 551 sputum specimens from the patients with doubtful tuberculosis and health volunteers were detected using smear microscopy, L-J medium culture, rRNA amplification assay and real-time PCR. L-J culture used as control, the sensitivity, specificity, positive predictive value and negative predictive value of rRNA assay were analyzed. The accordance rate between rRNA assay and real-time PCR was also analyzed. Results Compared with L-J culture, the sensitivity, specificity, positive predictive value and negative predictive value of rRNA assay were 98.5%, 95.0%，95.0% and 98.5%, respectively. Its sensitivity and specificity had significant difference between smear-positive and smear-negative specimens (P<0.01). Accordance rate between rRNA amplification assay and real-time PCR was 93.8%, which had significant difference between smear-positive and smear-negative specimens (P<0.05). Conclusion rRNA amplification assay has a higher sensitivity and specitivity, can shorten the detection time. It would be a promising laboratory diagnosis method.

Key words: tuberculosis, pulmonary/diagnosis, Mycobacterium tuberculosis, mucleic acid amplification techniques, sensitivity and speciticity

中图分类号:

R440

夏辉, 尚美, 刘冠, 李辉, 王海英, 闫国蕊, 杨红艺, 马晓光, 景辉, 赵雁林, . rRNA扩增方法对结核分枝杆菌临床诊断作用的评估[J]. 中国防痨杂志, 2010, 32(9): 104-108.

参考文献

［1］王易伟, 杨晓梅, 杜江渝, 余珑, 张春智, 孙川龙, 钟敏.rRNA扩增结核分枝杆菌直接检测(MTD)的临床初步应用［J］.中国防痨杂志,2003,25(Z1):48-49.
［2］　王易伟, 钟敏, 胡频频.rRNA扩增直接检测结核分枝杆菌的临床应用价值探讨［J］.中华检验医学杂志,2005,28(5):543-544.
［3］　桂晓虹,梅建,王奕峰.应用MTD试剂盒对结核分枝杆菌复合群进行快速检测的评价［J］.中华检验医学杂志,2007,30(7):805-808.
［4］　赵雁林,姜广路.中国结核病防治规划痰涂片显微镜检查标准化操作及质量保证手册［M］.北京：中国协和医科大学出版社,2009:7.
［5］中国防痨协会基础专业委员会.结核病诊断实验室检验规程［M］.北京：中国教育文化出版社2006:30.
［6］　Gamboa F, Fernandez G, Padilla E, Manterola JM, Lonca J, Cardona PJ, Matas L, Ausina V. Comparative evaluation of initial and new versions of the Gen-Probe AmplifiedMycobacterium TuberculosisDirect Test for direct detection ofMycobacterium tuberculosisin respiratory and nonrespiratory specimens［J］. J Clin Microbiol, 1998,36(3): 684-689.
［7］ O’Sullivan CE, Miller DRPS, Schneider PS, Roberts GD. Evaluation of Gen-Probe AmplifiedMycobacterium TuberculosisDirect Test by using respiratory and nonrespiratory specimens in a tertiary care center laboratory ［J］. J Clin Microbiol,2002,40(5): 1723-1727.
［8］ Piersimoni C, Callegaro A, Scarparo C, Penati V, Nista D, Bornigia S, Lacchini C, Scagnelli M, Santini G, De Sio G. Comparative evaluation of the new Gen-ProbeMycobacterium TuberculosisAmplified Direct Test and the semiautomated Abbott LCxMycobacterium tuberculosisassay for direct detection ofMycobacterium tuberculosiscomplex in respiratory and extrapulmonary specimens ［J］. J Clin Microbiol, 1998,36(12): 3601-3604.
［9］Pounder JI, Aldous WK, Woods GL. Comparison of real-time polymerase chain reaction using the Smart Cycler and the Gen-Probe amplifiedMycobacterium tuberculosisdirect test for detection ofM. tuberculosiscomplex in clinical specimens［J］.Diagn Microbiol Infect Dis, 2006,54(3): 217-222.
［10］ Sürücüoglu, S, Ozkütok N, Gazi H, Celik P. Assessment of performance of “amplifiedMycobacterium tuberculosisdirect test” in pulmonary and extra pulmonary specimens ［J］.Mikrobiyol Bu, 2007, 41(3): 377-84.
［11］Coll P,Garrigo M,Moreno C,marti N. Routine use of Gen-probe AmplifiedMycobacterium TuberculosisDirect (MTD) Test for detection ofMycobacterium tuberculosiswith smear-positive and smear-negative specimens［J］. Int J Tuberc Lung Dis, 2003,7(9):886-891.
［12］Vlaspolder F, Singer P, Roggeveen C. Diagnostic value of an amplification method (Gen-Probe) compared with that of culture for diagnosis of tuberculosis［J］. J Clin Microbiol, 1995; 33(10): 2699-2703.

[1]	刘晓莉, 雷丽梅, 郭周莉, 黄殷, 徐静, 赵霞, 王燕, 付莉. 结核病患者产生病耻感与领悟社会支持的相关性研究[J]. 中国防痨杂志, 2020, 42(9): 1002-1008.
[2]	中国防痨协会学术工作委员会《中国防痨杂志》编辑委员会. 抗结核药品固定剂量复合制剂的临床使用专家共识[J]. 中国防痨杂志, 2020, 42(9): 885-893.
[3]	靳鸿建. 我国县级结核病防治服务体系建设及防治工作亟需加强——一位老防痨工作者的意见和建议[J]. 中国防痨杂志, 2020, 42(9): 896-902.
[4]	张灿有, 夏辉, 成君. Ⅱ级生物安全柜在结核病实验室中的检测及报告要求[J]. 中国防痨杂志, 2020, 42(9): 903-909.
[5]	周林, 刘二勇, 孟庆琳, 陈明亭, 周新华, 高微微, 林明贵, 谢汝明. 《WS 288—2017 肺结核诊断》标准实施后肺结核诊断质量评估分析[J]. 中国防痨杂志, 2020, 42(9): 910-915.
[6]	刘二勇, 王前, 周林, 张国钦, 张修磊, 马永成, 杨枢敏, 王毳, 孟庆琳, 陈明亭, 林明贵, 屠德华. 我国部分地区病原学检测阴性肺结核诊断质量现状分析[J]. 中国防痨杂志, 2020, 42(9): 916-920.
[7]	孟庆琳, 李进岚, 林定文, 马永成, 侯双翼, 刘年强, 周林. 结核病防治从业人员对新的结核病标准相关知识知晓情况调查分析[J]. 中国防痨杂志, 2020, 42(9): 921-925.
[8]	王前, 周林, 刘二勇, 赵雁林, 李涛, 陈明亭, 杨丽佳, 王嘉. 我国县级结核病定点医疗机构结核病诊断能力现况调查研究[J]. 中国防痨杂志, 2020, 42(9): 926-930.
[9]	李婷, 何金戈, 苏茜, 李京, 李运葵, 高文凤, 高媛, 杨文. 结核菌素试验在四川省布拖县HIV感染/AIDS患者中筛查结核感染的价值[J]. 中国防痨杂志, 2020, 42(9): 931-936.
[10]	李运葵, 何金戈, 苏茜, 李婷, 李京, 高文凤, 杨文, 毛光玉. 结核病症状筛查在四川省布拖县HIV感染/AIDS患者中发现结核病患者的价值[J]. 中国防痨杂志, 2020, 42(9): 937-941.
[11]	苏茜, 夏勇, 逯嘉, 王丹霞, 何金戈. 2009—2018年四川省0~14 岁儿童肺结核流行特征分析[J]. 中国防痨杂志, 2020, 42(9): 942-947.
[12]	邓亚丽, 张天华, 刘卫平, 张宏伟, 马煜, 李鹏. 2014—2018年陕西省肺结核发病的时空聚集性分析[J]. 中国防痨杂志, 2020, 42(9): 948-955.
[13]	董晓, 赵珍, 刘年强, 王森路, 崔燕. 2009—2017年新疆维吾尔自治区老年肺结核发现特征分析[J]. 中国防痨杂志, 2020, 42(9): 956-961.
[14]	梁瑞云, 方伟军, 任会丽, 黎惠如, 张晖. 非结核分枝杆菌肺病并发与未并发糖尿病患者的CT征象研究[J]. 中国防痨杂志, 2020, 42(9): 962-967.
[15]	马廷龙, 韩毅, 程序, 刘志东. 超声抗结核药品电导入联合化疗对胸壁结核的疗效观察[J]. 中国防痨杂志, 2020, 42(9): 968-972.