中国防痨杂志 ›› 2012, Vol. 34 ›› Issue (3): 138-144.
都伟欣 董娜 陈保文 徐苗 杨蕾 卢锦标 沈小兵 王国治
DU Wei-xin,DONG Na,CHEN Bao-wen, XU Miao, YANG Lei, LU Jin-Biao, SHEN Xiao-Bing, WANG Guo-Zhi
摘要: 目的 建立疫苗评价用豚鼠免疫毒理学评价方法,并应用建立的评价指标对结核病新疫苗(耻垢疫苗)的免疫毒性进行初步评价。 方法 制备豚鼠过敏模型30只,阴性对照15只。建立豚鼠血清总IgG1抗体检测和外周血嗜碱粒细胞体外刺激培养上清、支气管肺泡灌洗液上清,以及腹腔灌洗液中肥大细胞体外刺激培养上清中的过敏性介质(组胺和白三烯)含量的检测方法。将豚鼠分成3组,分别为过敏模型组、耻垢疫苗组和阴性对照组,每组6只,应用已建立的以上几种评价指标初步进行了结核病新疫苗(耻垢疫苗)的免疫毒性评价。结果 以6 μg/ml羊抗豚鼠IgG1抗体包被,待测血清稀释1:105,以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗豚鼠IgG1抗体稀释1:20 000的实验条件为豚鼠血清总IgG1抗体的最佳检测方法。外周血嗜碱粒细胞体外刺激培养上清中,豚鼠过敏模型组和对照组中组胺含量分别为(99.37±15.34)nmol/L和(29.94±5.86)nmol/L;白三烯含量分别为(13.09±3.87)pg/ml和(2.22±0.53)pg/ml。支气管肺泡灌洗液上清组胺含量分别为(73.42±18.60)nmol/L和(31.00±12.09)nmol/L,白三烯含量分别为(123.20±16.57)pg/ml和(39.05±16.94)pg/ml。腹腔灌洗液中肥大细胞体外刺激培养上清中组胺含量分别为(39.59±12.94)nmol/L和(14.35±5.85)nmol/L,白三烯含量分别为(6.79±2.58)pg/ml和(3.09±1.18)pg/ml。以上3种不同组织来源的样本中,过敏模型组的组胺和白三烯含量与对照组相比差异均有统计学意义(组胺:t=12.60, t=5.41, t=5.20,P<0.05;白三烯:t=8.46, t=9.15, t=3.85,P<0.05)。应用以上方法评价结核病新疫苗未见免疫学毒理学异常反应。结论 实验初步建立了免疫毒理学评价方法,以该方法评价耻垢疫苗未见免疫毒理学异常反应。