中国防痨杂志 ›› 2018, Vol. 40 ›› Issue (7): 736-743.doi: 10.3969/j.issn.1000-6621.2018.07.013
摘要: 目的 建立一种用于分枝杆菌快速药物敏感性试验(简称“药敏试验”)的3,3'-[1-(苯氨酰基)-3,4-四氮唑]-二(4-甲氧基-6-硝基)苯磺酸钠(XTT)/1-甲氧基-5-甲基酚嗪硫酸甲酯(1-methoxy-PMS,mPMS)组合显色系统(简称“XTT/mPMS”),并加以评估。方法 测试XTT分别与mPMS及2-甲基-1,4-萘醌(2-methyl-1,4-NQ, mNQ)两种中间电子受体的最佳组合浓度、检测线性范围、反应时间、稳定性、细胞毒性、药物干扰作用等特性。以固体培养法作为金标准评估XTT/mPMS用于结核分枝杆菌临床分离株最低抑菌浓度(MIC)的药敏试验性能,并与刃天青显色法结果比较。结果XTT/mPMS和XTT/mNQ两种组合系统中,XTT和中间电子受体的最优组合浓度分别是0.2mmol/L和0.04mmol/L。这两种组合系统中,对耻垢分枝杆菌的显色反应较对牛分枝杆菌和结核分枝杆菌更为迅速(XTT/mPMS组合系统分别为60min、420min、420min;XTT/mNQ组合系统分别为60min、420min、420min)。XTT/mPMS和XTT/mNQ对3种分枝杆菌均为低毒性,能延长其到达稳定期的时间(约滞后12~48h)。XTT/mPMS与7H9液体培养基在37℃恒温中共培养,以及长时间储存中均具有较高的稳定性(37℃共培养可维持8d,25℃条件下稳定性不低于15d,4℃条件下稳定性不低于30d)。以固体培养法为金标准,XTT/mPMS用于结核分枝杆菌临床分离株的快速药敏试验(利福平、异烟肼)检测中,其特异度[分别为100.0%(17/17)和100.0%(13/13)]和敏感度[分别为95.7%(22/23)和92.6%(25/27)]与刃天青显色法[特异度分别为100.0%(17/17)和100.0%(13/13);敏感度分别为100.0%(23/23)和92.6%(25/27)]基本一致。结论 本实验室发现XTT/mPMS组合显色系统稳定、低毒、价格低廉,适合于对分枝杆菌进行快速药敏试验。